Princip rada vakuumske cijevi za prikupljanje krvi je prethodno ekstrahiranje epruvete za prikupljanje krvi s poklopcem glave u različite stupnjeve vakuuma i automatski prikupljanje uzorka venske krvi pomoću negativnog tlaka. Igla za prikupljanje krvi umetnuta je u ljudsku venu, a drugi kraj u gumeni čep vakuumske epruvete za prikupljanje krvi. Venska krv ljudskog tijela nalazi se u vakuumskoj cijevi za prikupljanje krvi, a pod djelovanjem negativnog tlaka spremnik za uzorkovanje krvi se uvlači kroz iglu za prikupljanje krvi, a pod jednom venskom punkcijom može se provesti prikupljanje više epruveta bez curenja . Volumen lumena povezan igle za prikupljanje krvi je mali, a utjecaj na volumen sakupljanja krvi je zanemariv, ali vjerovatnost pojave protustruje je relativno mala. Ako je volumen lumena veliki, troši se vakuum dijela epruvete za prikupljanje krvi, čime se smanjuje količina sakupljanja.
